蜘蛛丝是一种具有优良性能的生物材料,具有人造材料所没有的强度和韧性。蛛丝的基因由许多串联重复序列组成,例如壶腹大蜘蛛蛋白1(major ampullate spidroin 1,masp1)和鞭毛状丝蛛丝蛋白(flagelliform silk protein,flag),构建其表达载体往往费时费力,因此开发一种高效表达蛛丝的技术具有十分重要的现实意义。
为解决这一问题,中国科学院天津工业生物技术研究所研究员毕昌昊、张学礼团队和研究员张学礼团队,采用环形mrna(cmrna)的方法成功表达了masp1重组蛛丝蛋白和类鞭毛蛛丝蛋白(flagelliform silk-like protein,fslp)。该研究中,研究人员利用rna环化酶的成环机制设计生成masp1和fslp的cmrna,成环率分别为11.5%和44.5%。cmrna由于其结构特性,仅编码一个单元的masp1和fslp序列便为核糖体提供了一个理论上无限翻译的模板,生产出含有串联重复序列的重组蛛丝蛋白,分子量分别超过了110kda和88kda,蛋白质印迹法和质谱鉴定也证实了masp1和fslp的表达。masp1和fslp两种重组蛛丝蛋白的产量分别超过20mg/ml和80mg/ml。该研究为蛛丝和串联重复蛋白材料表达模板的构建,以及序列的表达提供了全新的思路和技术,可以简单地对多种材料蛋白进行表达的研究、构建和改造,将加速高强度蛋白材料领域的发展。
研究工作得到国家重点研发计划和国家自然科学基金的资助。相关研究成果发表在applied and environmental microbiology上。
核糖体围绕环形mrna翻译蛛丝蛋白
上一篇:新研究可预测肠癌术后复发风险